发布时间:2017-03-28来源:来源:中国科学报
本报讯(记者朱汉斌 通讯员黄博纯)近日,中国科学院广州生物医药与健康研究院呼吸疾病国家重点实验室结核病研究室张天宇课题组发明了新的可高效构建无抗性标记的分枝杆菌的抗性表达盒。相关研究3月24日在线发表于《前沿微生物学》上。
该课题组首次发现硫链丝菌素抗性基因(tsr)可用作结核菌、卡介苗等的抗性筛选基因。硫链丝菌素相对便宜、用量少,产生自发耐硫链丝菌素的结核菌的突变率极低。同时它不用于治疗结核,不用担心产生耐药的结核菌,且tsr用于对临床菌进行遗传操作较为理想。庆大霉素抗性基因(aacC1)可以用做耻垢分枝杆菌和大肠杆菌的抗性筛选基因。
该课题组把这两个基因优化加上合适的启动子,同时在两侧加上可以被分枝杆菌Xer系统识别的可自动解离的dif序列。这样就构成了dif-hsp60-aacC1-tsr-dif抗性表达盒。它可以用来高效构建大肠杆菌—分枝杆菌穿梭质粒,进而可以高效构建无抗性筛选标记的重组分枝杆菌,已申报专利。
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